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InspireSpark MJ5460 基因編輯試劑盒 國產(chǎn)

簡要描述:產(chǎn)品名稱:InspireSpark MJ5460 基因編輯試劑盒 國產(chǎn)
產(chǎn)品貨號:MJ5460
紅榮微再 MJ5460 基因編輯試劑盒 價格優(yōu)勢(Inspire Spark® PrimeRNP Kit)華雅思創(chuàng)現(xiàn)貨供應(yīng),歡迎咨詢

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):代理商
  • 更新時間:2025-07-23
  • 訪  問  量:100
詳細(xì)介紹
品牌紅榮微再貨號MJ5460
供貨周期現(xiàn)貨應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥,綜合

產(chǎn)品名稱:InspireSpark MJ5460 基因編輯試劑盒 國產(chǎn)
產(chǎn)品貨號:MJ5460
產(chǎn)品規(guī)格:50 rxn(含Solution I 75μL,Solution II 2.5mL)
儲存條件:-80℃(長期),-20℃(解凍后)

技術(shù)參數(shù):RNP復(fù)合物自遞送系統(tǒng),支持2000-4000 bp片段敲入

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產(chǎn)品概述

Inspire Spark® PrimeRNP Kit 是專為攻克原代細(xì)胞基因編輯瓶頸設(shè)計的革命性工具?;谧赃f送CRISPR/SpCas9系統(tǒng),無需電轉(zhuǎn)儀即可在 人原代T細(xì)胞、干細(xì)胞及難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系 中實現(xiàn)85-90%的敲除(KO)/敲入(KI)效率, 解決傳統(tǒng)方法毒性高、效率低的難題。


核心優(yōu)勢:三大技術(shù)突破

  1. 終結(jié)電轉(zhuǎn)依賴,解鎖原代細(xì)胞極限
    傳統(tǒng)電轉(zhuǎn)導(dǎo)致原代細(xì)胞死亡率>40%,而 Inspire Spark® 通過 eSpCas9-SgRNA自組裝復(fù)合物(37℃ 5分鐘成核),直接穿透細(xì)胞膜。實驗驗證:人原代T細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)后存活率>95%,編輯效率穩(wěn)定達(dá) 88.2±3.1%(n=15)。

  2. 雙高特性:高效率+低脫靶
    對比野生型Cas9, Solution I中優(yōu)化的eSpCas9蛋白 通過帶正電荷結(jié)構(gòu)域增強靶向性,脫靶率降低 4.2倍(全基因組測序驗證)。支持多基因同步編輯(≤4基因),KO/KI雙功能效率>85%。

  3. AAV輔助大片段敲入標(biāo)準(zhǔn)化
    兼容 AAV donor載體(MOI 2×10?-5×10?),實現(xiàn)2000-4000 bp定點整合,KI效率 50-80%。案例:TRAC位點CAR構(gòu)建成功率78.3%,遠(yuǎn)超慢病毒方案(<35%)。

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實驗流程(以人原代T細(xì)胞為例)

一、轉(zhuǎn)導(dǎo)復(fù)合物制備

混合1.5μL SgRNA(100μM) + 1.5μL Solution I → 37℃孵育5-10分鐘(形成RNP)。

加50μL Solution II(室溫預(yù)平衡) → 混勻后室溫靜置5分鐘。

二、細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)

細(xì)胞預(yù)處理:激活T細(xì)胞48小時后洗滌,離心去培養(yǎng)基(用OptiMEM/PBS清洗殘留)。

細(xì)胞沉淀重懸于轉(zhuǎn)導(dǎo)復(fù)合物 → 37℃孵育45分鐘。

三、培養(yǎng)與檢測

加600μL含10% FBS + 200U IL-2的T細(xì)胞培養(yǎng)基 → 接種至24孔板(密度2-3×10?/mL)。

培養(yǎng)4-5天后檢測編輯效率。

 

關(guān)鍵注意事項

應(yīng)用場景 操作要點

AAV輔助KI AAV體積≤5μL:RNP制備階段加入;>5μL:細(xì)胞培養(yǎng)階段加入(MOI: 2×10?-5×10?)

多基因編輯 方案A:混合多靶點RNP;方案B:分步轉(zhuǎn)導(dǎo)(間隔48小時,≤2基因/次)

細(xì)胞狀態(tài) 轉(zhuǎn)導(dǎo)前活性>90%

電轉(zhuǎn)兼容性 Solution I(eSpCas9)可單獨用于電轉(zhuǎn) → 效率較野生型提升30%


產(chǎn)品名稱:Inspire Spark® PrimeRNP Kit(基因編輯試劑盒)

貨號:MJ5460

規(guī)格:50 rxn

Inspire Spark PrimeRNP Kit基因編輯試劑盒,華雅思創(chuàng)現(xiàn)貨供應(yīng),歡迎咨詢

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InspireSpark® PrimeRNP Kit Q&A

Q:T細(xì)胞激活48小時后離心清洗的清洗液及鋪板培養(yǎng)基要求?

A:清洗液為實驗原用的T細(xì)胞培養(yǎng)基。操作流程:輕柔吹吸重懸細(xì)胞 → 離心(400 ×g, 5

min)→ 徹·底棄上清 → 用新鮮配制的同款T細(xì)胞培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。目的:防止T細(xì)胞過度激

活、去除碎片、優(yōu)化細(xì)胞狀態(tài)。

Q:實驗步驟中FBS能否替換為其他添加劑?

A:可使用人AB血清或無血清培養(yǎng)基(注:無血清條件下細(xì)胞生長狀態(tài)可能減弱)。

Q:轉(zhuǎn)導(dǎo)培養(yǎng)基含IL-2或血清替代物是否影響轉(zhuǎn)導(dǎo)?

A:無影響。通過離心清洗徹·底棄除上清(避免血清蛋白干擾),最終使用轉(zhuǎn)導(dǎo)復(fù)合物重懸

細(xì)胞沉淀即可。

Q:同時編輯兩個基因是否需要配置兩份混合液?能否同時加入細(xì)胞?

A:僅需將RNP1與RNP2加入同一份Solution II中孵育,無需分裝多份Solution II?;旌虾蟮?/span>

復(fù)合物可同時加入細(xì)胞。

Q:敲除(KO)和敲入(KI)能否同時實現(xiàn)?最多支持幾個基因編輯?

A:支持同步操作。多基因編輯需在制備轉(zhuǎn)導(dǎo)復(fù)合物時進(jìn)行多RNP制備,或分次轉(zhuǎn)導(dǎo)(建議

:首·次轉(zhuǎn)導(dǎo)≤2個基因,間隔48小時后再轉(zhuǎn)導(dǎo)≤2個基因)。

Q:Solution II能否搭配其他廠家的Cas9蛋白?是否支持電轉(zhuǎn)

A:可以使用,但未經(jīng)大量數(shù)據(jù)驗證,無法保證其編輯效率。

InspireSpark MJ5460 基因編輯試劑盒 國產(chǎn)基因編輯試劑盒,價格有優(yōu)勢,售后有保障

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